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轉(zhuǎn)基因食品檢測

??2021-08-17 閱讀:458

自1996年轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化以來,轉(zhuǎn)基因技術(shù)研究范圍不斷擴(kuò)大,轉(zhuǎn)基因食品也越來越多地走進(jìn)消費(fèi)者的生活。2011年,全球轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物種植面積達(dá)到1.6億公頃,大量的轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品被直接或間接的制成人類的食品,呈迅猛發(fā)展的趨勢。以轉(zhuǎn)基因生物為直接食品,作為原料加工生產(chǎn)的食品,以及喂養(yǎng)家畜得到的衍生食品,在廣義上都可以稱為轉(zhuǎn)基因食品。我國于2002年3月20日開始實(shí)行的《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物標(biāo)識(shí)管理辦法》規(guī)定,對(duì)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實(shí)行檢驗(yàn)檢疫和標(biāo)識(shí)制度。世界各國均對(duì)轉(zhuǎn)基因食品及其加工產(chǎn)品出具是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的認(rèn)定報(bào)告。因此轉(zhuǎn)基因食品的檢測顯得尤為重要。

轉(zhuǎn)基因技術(shù)是利用分子生物學(xué)技術(shù),將某些生物的基因轉(zhuǎn)移到農(nóng)作物中去,改造生物的遺傳物質(zhì),使其在性狀、營養(yǎng)品質(zhì)、消費(fèi)品質(zhì)方面向人類所需要的目標(biāo)轉(zhuǎn)變。轉(zhuǎn)基因食品的檢測主要從兩個(gè)方面入手,即核酸水平和蛋白質(zhì)水平,核酸水平主要檢測報(bào)告基因、啟動(dòng)子和終止子,是當(dāng)前轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的重要手段。核酸水平的檢測可分為定性和定量兩種。本文分別對(duì)賽默飛世爾科技(中國)有限公司(以下簡稱賽默飛)在核酸水平上進(jìn)行轉(zhuǎn)基因食品檢測的試劑和儀器進(jìn)行綜述。

轉(zhuǎn)基因提取試劑盒轉(zhuǎn)基因提取試劑盒( 貨號(hào):4466336)用來從復(fù)雜樣品中提取基因組DNA,繼而用于PCR或其它分子生物學(xué)技術(shù)。該試劑盒可處理的樣品類型包括原材料、食品成分、加工產(chǎn)品,例如種子、谷物、面粉、大豆粉、肉類、奶制品、果汁等。樣品勻漿后加入合適體積的裂解液1,溫浴裂解后離心去除沉淀,加入蛋白酶K和裂解液2再次裂解,加入乙醇混勻并轉(zhuǎn)移至過濾柱收集樣品,洗滌洗脫DNA.按照試劑盒操作說明書建議的樣品量和試劑量,可獲得0~10mg基因組DNA,提取產(chǎn)量與樣品加工程度有關(guān),經(jīng)多次理化加工過的樣品提取DNA量較低。

QuantStudio TM7 Flex實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀

QuantStudio TM7 Flex實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀一如既往地提供了ViiA TM7系A(chǔ)rray微流體芯片之間更換。利用不同的染料、形式和自動(dòng)化應(yīng)用潛能,使不同應(yīng)用之間的切換變得更為簡單。

較高的應(yīng)用多樣性優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案和試劑及直觀的軟件可滿足最廣泛的應(yīng)用要求。

快速上手QuantStudio.7 Flex系統(tǒng)直觀的軟件、簡單的觸摸屏設(shè)置、自動(dòng)化集成以及輕松的加熱模塊更換,可以立刻上手操作。

更快速地獲得更多結(jié)果采用TaqMan.Array微流體芯片和Twister TM機(jī)器人可輕松運(yùn)行數(shù)百個(gè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)。QuantStudio.7 Flex系統(tǒng)可在自動(dòng)化條件下使通量性能化。

模塊靈活性熱循環(huán)模塊可輕松更換,針對(duì)不同研究項(xiàng)目可以選擇標(biāo)準(zhǔn)96孔,快速96孔,快速384孔和TaqMan.低密度芯片模塊。定制的TaqMan.低密度芯片(圖3)是一種預(yù)置引物探針的384孔微流體芯片,無需液體機(jī)器人或多通道移液器裝載樣品即可同時(shí)完成384個(gè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)。這種高度靈活的芯片可以對(duì)1~8個(gè)樣品平行檢測12~384個(gè)TaqMan.目標(biāo)基因(包括產(chǎn)品對(duì)照)。TaqMan.低密度芯片快速、通量高,所需核酸量少,一次可以鑒定多種玉米、大豆等轉(zhuǎn)基因品系。

轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒

實(shí)時(shí)熒光定量PCR是檢測食品中轉(zhuǎn)基因成分最常用的方法,是通過對(duì)PCR擴(kuò)增反應(yīng)中產(chǎn)物的熒光信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測,對(duì)起始模板進(jìn)行定量或定性分析。賽默飛的TaqMan.轉(zhuǎn)基因篩查試劑盒可檢測食品和飼料樣品DNA中主要轉(zhuǎn)基因元件的存在,并通過對(duì)轉(zhuǎn)基因元件與內(nèi)源基因進(jìn)行定量來計(jì)算轉(zhuǎn)基因成分含量。該試劑盒可檢測所有經(jīng)歐盟批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品以及國際數(shù)據(jù)庫中所描述的大部分轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,并于Applied Biosystems所有熒光定量PCR儀上進(jìn)行過優(yōu)化。該試劑盒具有靈活、快速、高準(zhǔn)確度和高靈敏度的優(yōu)勢,可對(duì)48個(gè)樣品分別進(jìn)行4個(gè)獨(dú)立的雙重檢測反應(yīng),即3組調(diào)控區(qū)域(P35S/CaMV,P34S/FMV,TNOS/A. tumefaciens)和植物內(nèi)源基因/內(nèi)部陽性對(duì)照(IPC)。

另外,賽默飛還有TaqMan.轉(zhuǎn)基因玉米35S檢測試劑盒(貨號(hào):4327690)和TaqMan.轉(zhuǎn)基因大豆35S檢測試劑盒(貨號(hào):4327691),利用兩種不同熒光標(biāo)記的探針分別檢測35S啟動(dòng)子元件和植物內(nèi)源基因,從而計(jì)算轉(zhuǎn)基因成分含量。

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